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elisa測(cè)抗原實(shí)驗(yàn)報(bào)告范文（通用7篇）
在人們素養(yǎng)不斷提高的今天，報(bào)告使用的次數(shù)愈發(fā)增長(zhǎng)，報(bào)告具有雙向溝通性的特點(diǎn)。一起來(lái)參考報(bào)告是怎么寫的吧，下面是小編收集整理的elisa測(cè)抗原實(shí)驗(yàn)報(bào)告范文，歡迎大家借鑒與參考，希望對(duì)大家有所幫助。
elisa測(cè)抗原實(shí)驗(yàn)報(bào)告 1
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模豪?ELISA 技術(shù)檢測(cè)樣本中是否存在特定病毒抗原，以輔助疾病診斷。
實(shí)驗(yàn)材料：待檢樣本、病毒抗原特異性抗體、酶標(biāo)二抗、底物顯色液、ELISA 試劑盒配套試劑與耗材。
實(shí)驗(yàn)步驟：首先對(duì) ELISA 板進(jìn)行包被，將捕獲抗體固定在板孔表面；然后加入待檢樣本，孵育使抗原與抗體結(jié)合；洗滌后加入酶標(biāo)二抗，再次孵育并洗滌；最后加入底物顯色液，根據(jù)顏色變化判斷結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：部分樣本孔出現(xiàn)明顯顯色反應(yīng)，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比，初步判斷這些樣本中存在目標(biāo)病毒抗原。
實(shí)驗(yàn)分析與結(jié)論：本次實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程規(guī)范，但在樣本處理環(huán)節(jié)可能存在個(gè)別樣本交叉污染情況。結(jié)果表明 ELISA 技術(shù)能夠有效檢測(cè)出樣本中的病毒抗原，為疾病診斷提供了有力依據(jù)，但需進(jìn)一步優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程以減少誤差。
elisa測(cè)抗原實(shí)驗(yàn)報(bào)告 2
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模哼\(yùn)用 ELISA 方法檢測(cè)食品中是否含有常見(jiàn)過(guò)敏原抗原，保障食品安全。
實(shí)驗(yàn)材料：各類食品樣本、過(guò)敏原特異性抗體、酶結(jié)合物、終止液等。
實(shí)驗(yàn)步驟：依次進(jìn)行包被、封閉、加樣、孵育、洗滌、加酶標(biāo)二抗、孵育洗滌、加底物顯色及終止反應(yīng)等步驟。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在幾種堅(jiān)果類食品樣本中檢測(cè)到了相應(yīng)的.過(guò)敏原抗原，而其他食品樣本未出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)分析與結(jié)論：實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格控制了溫度和時(shí)間等條件，但在洗滌步驟中可能存在洗滌不徹底的問(wèn)題。結(jié)果說(shuō)明 ELISA 可用于食品過(guò)敏原檢測(cè)，對(duì)于預(yù)防食物過(guò)敏事件具有重要意義，后續(xù)需改進(jìn)洗滌操作以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。
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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模翰捎?ELISA 技術(shù)檢測(cè)植物組織樣本中是否存在特定病原菌抗原，為植物病害防治提供依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)材料：患病植物組織提取液、病原菌特異性抗體、羊抗兔 IgG-HRP 等。
實(shí)驗(yàn)步驟：ELISA 板包被抗體后，加入植物組織提取液，后續(xù)按常規(guī) ELISA 流程進(jìn)行操作。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在表現(xiàn)出明顯病害癥狀的植物樣本中檢測(cè)到了病原菌抗原，健康植物樣本為陰性。
實(shí)驗(yàn)分析與結(jié)論：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中樣本提取可能存在雜質(zhì)殘留影響結(jié)果。ELISA 可用于快速檢測(cè)植物病原菌抗原，對(duì)于及時(shí)發(fā)現(xiàn)和防治植物病害具有重要價(jià)值，后續(xù)實(shí)驗(yàn)需優(yōu)化樣本提取方法。
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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模豪?ELISA 檢測(cè)動(dòng)物血清樣本中特定疫病抗原，輔助動(dòng)物疫病診斷與防控。
實(shí)驗(yàn)材料：動(dòng)物血清、疫病抗原特異性抗體、TMB 底物溶液等。
實(shí)驗(yàn)步驟：標(biāo)準(zhǔn)的 ELISA 操作流程，包括包被、加樣、孵育、洗滌、加酶標(biāo)抗體、顯色等。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：部分養(yǎng)殖場(chǎng)送檢的動(dòng)物血清樣本呈現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，表明這些動(dòng)物可能感染了目標(biāo)疫病。
實(shí)驗(yàn)分析與結(jié)論：實(shí)驗(yàn)中存在不同批次試劑可能導(dǎo)致的`誤差。結(jié)果顯示 ELISA 在動(dòng)物疫病抗原檢測(cè)方面具有良好的應(yīng)用前景，但需對(duì)試劑質(zhì)量進(jìn)行更嚴(yán)格把控，以提高檢測(cè)的可靠性。
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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^(guò) ELISA 技術(shù)測(cè)定生物制品中目標(biāo)抗原的'含量，確保產(chǎn)品質(zhì)量。
實(shí)驗(yàn)材料：生物制品樣本、已知濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品、抗該抗原的單克隆抗體等。
實(shí)驗(yàn)步驟：先制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后對(duì)生物制品樣本進(jìn)行稀釋后加樣，按照 ELISA 常規(guī)步驟操作。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出生物制品樣本中抗原的含量，與產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比，判斷是否符合要求。
實(shí)驗(yàn)分析與結(jié)論：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中樣本稀釋倍數(shù)的準(zhǔn)確性對(duì)結(jié)果影響較大。結(jié)果表明 ELISA 可用于生物制品抗原含量測(cè)定，為產(chǎn)品質(zhì)量控制提供了有效手段，后續(xù)需更精確地控制樣本稀釋過(guò)程。
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一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme-linked immunosorbent assay 簡(jiǎn)稱ELISA）是在免疫酶技術(shù)（immunoenzymatic techniques）的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù),ELISA過(guò)程包括抗原（抗體）吸附在固相載體上稱為包被，加待測(cè)抗體（抗原）, 再加相應(yīng)酶標(biāo)記抗體（抗原）,生成抗原（抗體）－－待測(cè)抗體（抗原）－－酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物，再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計(jì)的光吸收計(jì)算抗體（抗原）的量。待測(cè)抗體（抗原）的定量與有色產(chǎn)生成正比。
二．實(shí)驗(yàn)原理
用于免疫酶技術(shù)的酶有很多，如過(guò)氧化物酶，堿性磷酸酯酶，β－Ｄ－半乳糖苷酶，葡萄糖氧化酶，碳酸酐酶，乙酰膽堿酯酶，6－磷酸葡萄糖脫氧酶等。常用于ELISA法的酶有辣根過(guò)氧化物酶，堿性磷酸酯酶等，其中尤以辣根過(guò)氧化物酶為多。由于酶摧化的是氧化還原反應(yīng)，在呈色后須立刻測(cè)定，否則空氣中的氧化作用使顏色加深，無(wú)法準(zhǔn)確地定量。
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）是一種糖蛋白，每個(gè)分子含有一個(gè)氯化血紅素（protonhemin）區(qū)作輔基。酶的濃度和純度常以輔基的含量表示。氯化血紅素輔基的最大吸收峰是403nm，HRP酶蛋白的最大吸收峰是275nm，所以酶的濃度和純度計(jì)算式是（已知HRP的A（1cm 403nm 1%）＝25，式中1％指HRP百分濃度為100ml含酶蛋白1g，即10mg/ml，所以，酶濃度以 mg/ml 計(jì)算是HRP的A（1cm 403nm mg/ml=2.5）HRP純度（RZ）=A403nm/A275nm純度RZ（Ｒeinheit Zahl）值越大說(shuō)明酶內(nèi)所含雜質(zhì)越少。高純度HRP的RZ值在3.0左右，最高可達(dá)3.4。用于ELISA檢測(cè)的HRP的RZ值要求在3.0以上。
ELISA的基本原理有三條：
�。�1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；
（2）抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
（3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體，而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大，可概括四個(gè)方面：
1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。
4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。
基本方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
基本方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml， 每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。 ↓
加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照） ↓
于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 ↓
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
�。ǘ� 酶與底物
酶結(jié)合物是酶與抗體或抗原, 半抗原在交聯(lián)劑作用下聯(lián)結(jié)的'產(chǎn)物。是ELISA成敗的關(guān)鍵試劑，它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應(yīng)，還具有酶促反應(yīng)，顯示出生物放大作用，但不同的酶選用不同的底物。
免疫技術(shù)常用的酶及其底物
* 終止劑為2mol/L H2SO4
** 終止劑為2 mol/L檸檬酸， 不同的底物有不同的終止劑。
可催化下列反應(yīng)： HRP+H2O2→復(fù)合物 復(fù)合物+AH2→過(guò)氧化物酶+H2O+A AH2 ——為無(wú)色底物, 供氫體； A—— 為有色產(chǎn)物。
�。ㄈ� ELISA常用的四種方法
1．直接法測(cè)定抗原 將抗原吸附在載體表面；
加酶標(biāo)抗體，形成抗原—抗體復(fù)合物； 加底物。底物的降解量＝抗原量。
2．間接法測(cè)定抗體
將抗原吸附于固相載體表面； 加抗體, 形成抗原-抗體復(fù)合物； 加酶標(biāo)抗體；
加底物。 測(cè)定底物的降解量＝抗體量。
3．雙抗體夾心法測(cè)定抗原
將抗原免疫第一種動(dòng)物獲得的抗體吸附于固相表面;加抗原，形成抗原-抗體復(fù)合物;
加抗原免疫第二種動(dòng)物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復(fù)合物;加酶標(biāo)抗抗體（第二種動(dòng)物抗體的抗體）; 加底物。底物的降解量＝抗原量。
4. 競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定抗原
將抗體吸附在固相載體表面;
�。�1） 加入酶標(biāo)抗原；
（2）,（3）加入酶標(biāo)抗原和待測(cè)抗原；
加底物。對(duì)照孔與樣品孔底物降解量的差＝未知抗原量。
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入校新生；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）；乙肝表面抗原（HBsAg）
肝功能檢查是診斷肝炎的主要指標(biāo)，國(guó)內(nèi)獻(xiàn)血員篩選仍以乙肝表面抗原（HBsAg）的檢測(cè)為依據(jù)［1］。HBsAg是HBV感染的特異性指標(biāo)。大學(xué)生多集體生活，易造成肝炎的流行。每年對(duì)入校新生的肝功能檢查和HBsAg的檢測(cè)是很必要的，為此，我們對(duì)入校新生集體組織抽血檢查，現(xiàn)將2003年、2004年入校新生檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下。
1一般資料
11對(duì)象
研究對(duì)象是2003年全部入校新生3698人，其中男生1420人，女生2278人。2004年全部入校新生4377人，男生1805人，女生2572人。年齡18~22歲，所有的標(biāo)本為空腹靜脈血，并于24h內(nèi)分離血清。
12儀器與方法
用反向被動(dòng)血凝試驗(yàn)測(cè)定HBsAg，谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）用賴氏法測(cè)定［２］。使用上海榮盛生物技術(shù)公司生產(chǎn)的谷丙轉(zhuǎn)氨酶試劑盒，用廈門分析儀器廠生產(chǎn)的721分光光度計(jì)比色，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出谷丙轉(zhuǎn)氨酶的單位。
2結(jié)果
檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1，表2。由表1，表2可以看出，我校2003年入校新生中HBsAg攜帶者31人，其攜帶率為084%（31/3698），其中女生13人，攜帶率057%（13/2278），男生18人，攜帶率127%（18/1420）；GPT＞80U/L3人，異常率為008%由表1，表2還可看出無(wú)論是2003年新生還是2004年新生，男生HBsAg攜帶率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于女生。表12003年入校新生HBsAg攜帶率及GPT異常率的檢測(cè)結(jié)果（略）表22004年入校新生HBsAg攜帶率及GPT異常率的檢測(cè)結(jié)果（略）
3討論
資料顯示，我校新生HBsAg攜帶率2003年為084%，2004年為067%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于我省HBsAg攜帶率（我省HBsAg攜帶率一般在7%左右）。男生的HBsAg攜帶率高于女生的原因，我們認(rèn)為可能與生活方式有關(guān)，如男生喜歡幾個(gè)人聚在一起吃飯、喝酒，而女生卻很少有這種愛(ài)好，所以肝炎在男生中傳播的機(jī)率就大一點(diǎn)。雖然我校學(xué)生HBsAg攜帶率偏低，但是也不能忽視，我國(guó)是乙型肝炎病毒（HBV）感染高發(fā)區(qū)，大約有98%的人攜帶乙肝病毒，每年有30萬(wàn)人死于與乙肝有關(guān)的肝癌及肝硬化。因此，對(duì)正常的學(xué)生做好乙肝疫苗的接種，杜絕乙肝的傳播是很重要的。有報(bào)道820例幼兒接種乙肝疫苗后產(chǎn)生的免疫應(yīng)答率為99268%，接種效果高于國(guó)內(nèi)9677%的.報(bào)道［3］。對(duì)于HBsAg攜帶者和GPT增高者，做好早發(fā)現(xiàn)、早治療。病毒性肝炎已成為威脅人們健康的嚴(yán)重疾病，做好乙肝疫苗的接種，對(duì)學(xué)生進(jìn)行乙肝知識(shí)的培訓(xùn)，讓他們了解乙肝的傳播途徑和預(yù)防措施，養(yǎng)成良好的生活習(xí)慣，加強(qiáng)自我保護(hù)意識(shí)。
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